基因分析仪十大常见问题

毛细管电泳（CE）基因分析仪平台，你知道有哪些吗？

1987年，赛默飞Applied Biosystems在Sanger测序原理的基础上发布第一代真正商业化的自动测序仪。

1996年，推出310型全自动遗传分析仪，实现全部操作自动化，包括自动灌胶、自动进样、自动数据收集分析等。也标志着从平板胶进入毛细管电泳时代。

随后，伴随着仪器的更新，通量逐渐提高，出现我们常见的3130系列、3730系列以及经典的3500系列。其中3500Dx和3500xl Dx基因分析仪已获得NMPA认证。

站在巨人的肩膀上，2017年，推出最简便、自动化程度最高的一款基因分析仪，它就是SeqStudio。

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基因分析仪的两大功能，您了解吗？

经过数十年结果的验证，Sanger测序是DNA测序的金标准，此外，多重片段分析也是您广泛应用的遗传分析技术。

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Sanger 测序的工作流程有哪些，您了解吗？

Sanger测序的工作流程从样本制备到最终数据分析，包括PCR扩增、PCR产物纯化、循环测序、测序反应纯化、毛细管电泳和数据分析。如图，赛默飞提供Sanger测序全套解决方案。

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BigDye测序试剂盒，V1.1、V3.1、Direct，您get 了吗？

测序试剂盒可以根据具体的实验需求进行选择，可参考如下的表格：

* Recommended: ++

* Satisfactory: +

* Not recommended: -

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Sanger测序流程中，循环测序反应时PCR产物的用量究竟要加多少？

不同长度的PCR片段对产物的需求量不一样，一般可参考如下列表：

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POP-4、POP-6、POP-7胶，傻傻分不清楚？

POP4聚合物可实现快速反应，更适合于人类身份鉴定和片段分析。POP6聚合物是进行长片段测序的理想选择。当和BigDye V1.1一起使用时，POP-6也可以用于测定非常靠近5’端的碱基。POP-7聚合物介于POP-4和POP-6之间，他非常的灵活，适用于很多的应用。

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片段分析，通过分离荧光标记的片段并检测其相对大小，荧光标记怎么设计？

一种是在引物5’端标记荧光基团，另一种是用荧光标记ddNTP。

5’端引物标记通常用于微卫星序列分析；荧光标记ddNTP通常用于SNaPshot多重分析。

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片段分析数据信号强度的范围是多少？

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片段分析实验常用的荧光染料组合有哪些？分别包含哪些荧光染料？

片段分析实验常用的荧光染料组合为G5和E5。

G5染料组合包括6-FAM、VIC、NED、PET和LIZ，通常用于微卫星序列分析。

E5染料组合包括dR110、dR6G、dTAMRA、dROX和LIZ，主要用于SNaPshot 重分析。

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基因分析仪上的数据，选择什么软件分析？

· 测序数据.ab1文件建议用Sequence Analysis软件进行分析；

· 片段分析数据.fsa文件建议用GeneMapper软件进行分析；

· 人类鉴定数据.hid文件建议用GeneMapper ID-X软件进行分析